1、冷凍越慢越好，復蘇越快越好

細胞冷凍越慢越好，細胞冷凍前，要有充足的時(shí)間;復蘇是相反的，速度越快越好。從液氮罐里取出來(lái)之后，迅速放在37℃水浴中，然后使勁搖，讓它盡快融化。

2、細胞凍存和復蘇注意事項

和液氮接觸時(shí)，要戴保護眼鏡和手套。因為復蘇過(guò)程中搖晃，小瓶有可能會(huì )爆炸;還有，凍存液中的DMSO是有毒致癌的。所以接觸的時(shí)候一定要帶好手套。

3、凍存細胞數量要足夠

無(wú)論再怎么小心，細胞在冷凍和復蘇過(guò)程中總會(huì )死掉一批的。所以，一開(kāi)始凍存細胞的數量要足夠。

4、做好標記

把培養瓶放入提手，末端應該扎有小牌，注明主人的名字，細胞名稱(chēng)和凍存日期。還要在每個(gè)凍存管上寫(xiě)上細胞名稱(chēng)，代數和凍存日期。實(shí)驗室的液氮罐都是公用的。每個(gè)人應該有屬于自己的提手，會(huì )為找自己液氮罐省去好多時(shí)間。

5、細心照料

復蘇的細胞非常脆弱，需要我們的細心呵護。一切和細胞接觸的動(dòng)作都要輕柔。

6、DMSO的問(wèn)題

前面提到了DMSO是一種有毒致癌物質(zhì)。那么，解凍之后，應不應該去除凍存液中的DMSO呢?

是不需要去除的。除了極少數特別注明的對DMSO敏感的細胞外，99%的細胞都不需要去除DMSO。解凍后的頻繁換液會(huì )慢慢去除掉DMSO的。

7、解凍前后細胞所用物質(zhì)要相同

因為每一種細胞都有自己特定的，并且已經(jīng)熟悉了的生長(cháng)環(huán)境。突然使用不一樣的培養液和血清，會(huì )造成細胞生長(cháng)不良，甚至死亡。

細胞培養是個(gè)費力的事情，要經(jīng)常關(guān)注。要時(shí)刻注意培養箱里面的細胞是不是該換液了。而掌握了有效的凍存和復蘇的技術(shù)，就可以解決這個(gè)問(wèn)題。