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選擇真核和細菌細胞儲存冷凍保護劑

點(diǎn)擊次數:695 更新時(shí)間:2020-05-22

冷凍保護劑的實(shí)驗室選擇為真核生物和細菌細胞保存的長(cháng)期儲存可以具有用于將來(lái)的實(shí)驗結果產(chǎn)生深遠的影響??箖鰟?,字面意思是“保護細胞和組織造成的損害凍結”,可以人為的,或者在本質(zhì)上產(chǎn)生的。例如,植物和動(dòng)物的一些種類(lèi)產(chǎn)生防凍特性的物質(zhì),以幫助他們渡過(guò)寒冷的環(huán)境。糖海藻糖是一種這樣的化合物,并正在測試作為實(shí)驗室使用冷凍保護劑的選擇。液氮罐

Cryo2

用于低溫儲存箱瓶

這些細胞監護人通常配制與其它物質(zhì)如蒸餾水,乙二醇和/或牛血清以創(chuàng )建一個(gè)理想的配方為凍結。冷凍保護劑被分為兩類(lèi):細胞外和細胞內。胞外冷凍保護劑被非穿透通過(guò)減少發(fā)生高滲細胞裂解功能的分子
在冷凍過(guò)程中。胞內冷凍保護劑穿透細胞膜,并防止冰晶,其破裂細胞膜的形成。這里我們討論在核/含細胞器的真核細胞的冷凍保存用這些解決方案的影響,和更簡(jiǎn)單的結構的細菌細胞。

冷凍保護劑外

胞外冷凍保護劑不穿透的真核細胞或細菌細胞壁的膜。因為這個(gè)原因,它們不能防止發(fā)生細胞內水的晶體形成的結果細胞膜破裂。這些非穿透分子??的實(shí)例是蔗糖,右旋糖和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。

與細胞樣品和冷凍保護劑小瓶

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相反,這些分子的作用,以減少形成通過(guò)冷凍過(guò)程樣品過(guò)渡高滲梯度。作為較少的水可充當細胞外溶質(zhì),鹽濃度急劇增加。對細胞的增加的滲透壓引起細胞形狀的改變,細胞相互作用,分子的亞細胞分布,并**終細胞活力。

胞外冷凍保護劑的存在下用于平衡滲透壓差和防止水的流出從細胞。并且,由于這些分子不穿透膜,它們不具有在細胞生理學(xué)一個(gè)直接的,有害的影響。

細胞內冷凍保護劑

胞內冷凍保護劑,如二甲基亞砜(DMSO)和甘油,已成為冷凍保存支柱試劑。這兩種分子具有穿透細胞膜,以減少在冷凍過(guò)程中水的晶體的小區內的形成的能力。要使用這些試劑時(shí),保持細胞活力,凍結協(xié)議必須是緩慢和控制,從而出現水外排。

為細胞樣品的存儲絕熱低溫容器

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如果過(guò)程過(guò)快,在細胞內的冰晶會(huì )形成前的水能夠退出細胞。

而DMSO和甘油分別具有被傳統用于真核生物和細菌細胞的冷凍保存,還存在著(zhù)缺點(diǎn)這種方式。在某些情況下這兩種分子在相同的蛋白質(zhì)逆效應。此外,不同的細胞類(lèi)型對這些分子不同的透氣性。這種差異會(huì )影響在哪些小區收縮和冷凍,冷凍過(guò)程中前膨脹,并且在解凍循環(huán)的速率。這可能對細胞活力顯著(zhù)的影響。

因此,人們需要密切考慮到使用的冷凍保護劑存在的類(lèi)型和濃度。文獻針對您的細胞類(lèi)型和小規模試驗標準操作規程仔細分析可以節省不必重復漫長(cháng)的實(shí)驗作為冷凍保存不佳的情況而受挫和成本。液氮罐

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